Подсчет клеток эндотелия роговицы

Передняя часть глазного яблока представлена роговицей. Существует множество заболеваний и состояний, которые меняют ее клеточный состав.

Чтобы их выявить, применяют эндотелиальную микроскопию роговицы глаза.

Это неинвазивная процедура, осуществляемая с помощью микроскопа последнего поколения. Главным его преимуществом является точность и отсутствие соприкосновения окуляра с поверхностными структурами глаз. На основе полученных данных можно поставить достоверный диагноз и начать лечение.

Показания к обследованию

Эндотелиальная микроскопия проводится не всегда, только по показаниям. Для этого у пациента должна появиться клиническая симптоматика:

помутнение, отек роговицы;
появление рубцов на роговице;
снижение остроты зрения;
изменение толщины роговицы;
нарушение рефракционной способности глаз, что приводит к миопии или близорукости.

Методику применяют для определения следующих заболеваний:

воспаление сосудистой оболочки глаза (увеит);
глаукома – повышение внутриглазного давления за счет притока секретируемой жидкости в камеры глаз;
дистрофия поверхностных структур глаз;
кератит – воспаление роговицы.

Процедуру рекомендовано проводить перед осуществлением хирургического вмешательства, чтобы выявить состояние поверхностных структур органов зрения. Если роговица истончена, клетки находятся далеко друг от друга, это прямое противопоказание к проведению хирургического вмешательства.

Методика также показана перед проведением трансплантации роговицы. При этом донор и реципиент должны совпадать по клеточному материалу пересаживаемой ткани.

Эндотелиальная микроскопия роговицы глаза Процедуру проводят для мониторинга за состоянием тканей после проведения хирургического вмешательства. С помощью микроскопии выявляется степень приживления клеток, качество роговицы после разреза.

Противопоказания

Процедура не относится к инвазивным. Она не причиняет боль, проводится очень быстро, поэтому ее можно применять даже к категориям пациентов, у которых наблюдается повышенная чувствительность глазных яблок. Время выполнения – несколько минут. Методика выполняется для людей разных возрастов, она возможна как для младенцев, так и для пожилых людей.

Единственное противопоказание к проведению процедуре – наличие лежачего больного. Аппарат действует только для людей в сидячем положении.

Данные могут быть некорректными или вовсе не выполнимыми при следующих состояниях:

сильное помутнение, рубцевание роговицы;
сильный отек роговицы.

Процедура полностью невыполнима, когда не определяются даже границы клеток, что образуется вследствие сильнейшего помутнения и изменения структуры эндотелия.

Что показывает эндотелиальная микроскопия

С помощью методики можно рассмотреть различные параметры поверхностного слоя роговицы:

плотность прилегания клеток друг к другу;
разница в размерах ближайших идентичных клеток;
количество клеток правильной и неправильной формы;
определение темных зон, которые проявляются после воспалительных состояний, после операционных вмешательств.

Методика позволяет изучить все эти показатели при жизни. То есть для проведения микроскопии не требуется извлечения кусочка ткани.

Как происходит обследование

Процедура проводится в несколько этапов:

глаза и кожные поверхности должны быть чистыми, поэтому перед процедурой рекомендуется промыть эти области проточной водой или с помощью антисептических средств;
человек садится перед микроскопом, на его глаза наводят окуляр;
глаза должны быть открытыми в течение нескольких секунд, за это время происходит фотографирование различных зон роговицы.

Специфической подготовки к проведению процедуры не требуется.

Расшифровка результатов

Врач-лаборант выдает бланк, на котором записаны различные показатели строения роговицы. Его необходимо отнести к лечащему врачу, чтобы он произвел расшифровку, рассказал, нормальны ли результаты, назначил лечение. На бланке исследования будут обозначены следующие результаты:

плотность клеток эндотелия на 1мм2;
коэффициент полимегатизма клеток;
плеоморфизм (размер, строение, форма клеток, которая отличается или идентична нормальным клеточным элементам роговицы);
отсутствие просматривания эндотелия (темные зоны).

С помощью эндотелиальной микроскопии роговицы выявляются параметры, не доступные для определения невооруженным взглядом. До настоящего момента такие данные определялись только при биопсии, которая осуществлялась не при жизни, а после смерти пациента. С помощью методики можно подготовиться к операционному вмешательству, следить за состоянием пациента после его проведения.

Полезное видео

Была ли статья полезной?
Оцените материал по пятибальной шкале!

Если у вас остались вопросы или вы хотите поделиться своим мнением, опытом — напишите комментарий ниже.

Что еще почитать

Источник

Эндотелий роговицы представляет собой один слой плоских гексагональных (шестигранных) клеток, выстилающих заднюю поверхность роговицы и входящих в соприкосновение с содержимым передней камеры глаза.

Эндотелий роговицы Основная функция эндотелиальных клеток – насосная, именно благодаря работе этих клеток происходит отведения избытка жидкости из роговицы. Основной опасностью, которая подстерегает роговицу при нарушении функции насосной системы эндотелия, является значительное уменьшение прозрачности роговицы, вплоть до состояния, когда последняя становится похожей на матовое стекло.

Многочисленные воздействия могут нарушить обмен веществ эндотелия роговицы и таким образом повредить саму роговицу: операции на глазах, воздухонепроницаемые контактные линзы, химические вещества, лекарства, вредные вещества в воздухе.

Особенностью эндотелиального слоя является его неспособность ни к регенерации, ни к делению. В результате потери эндотелиальных клеток, оставшиеся клетки берут на себя повышенную нагрузку, распластываясь, занимают всю свободную площадь. Однако, компенсаторные механизмы имеют свои пределы, поэтому с прогрессированием патологического процесса отмечается помутнение роговицы, её отек и значительное снижение остроты зрения.

Подсчет клеток эндотелия роговицы При рождении плотность эндотелиальных клеток колеблется от 3500 до 4000 кл/мм2, во взрослом состоянии плотность их снижается до 2500 – 1400 кл/мм2. При концентрации эндотелиальных клеток до 1000 на 1 мм2 роговица человека сохраняется свою прозрачность, а при 400-700 кл/мм2 сохранение эндотелиального пласта возможно, однако трофика роговицы страдает, что приводит к ее помутнению.

2497 клеток/мм2 509 клеток/мм2

(Норма) (критическое снижение)

Четкое изображение эндотелия и возможность определить плотность клеток на единицу площади, их средний размер дает эндотелиальная микроскопия.

В клинике «ВІЗУС» для выполнения снимка роговичного эндотелия используется эндотелиальный микроскоп TOPCON SP-3000P.

Измерение количества эндотелиальных клеток и толщины роговицы стало как никогда проще, удобнее для врача и комфортнее для пациента.

Инструмент автоматически подсчитывает количество клеток эндотелия на единицу площади роговицы и определяет вариабельность формы и размеров клеток.

Основные качества диагностического прибора, на котором проводится обследование:

Неинвазивный способ просмотра и получения изображения эндотелиального слоя роговицы человека in vivo
Высокая разрешающая способность
Быстрота обследования (занимает всего несколько секунд)
Достоверность показателей
Бесконтактный метод обследования (при измерении прибор не касается поверхности роговицы, что устраняет опасность попадания в глаза инфекции или физического повреждения глаза.
Все исследования абсолютно безболезненны и безвредны.

Эндотелиальная микроскопия роговицы незаменима при диагностике заболеваний роговицы, а также при оценке эндотелия до и после оперативных вмешательств на глазах.

В клинике «ВІЗУС» подсчет эндотелиальных клеток включен в комплекс обязательного предоперационного обследования пациентов с катарактой, что позволяет выработать оптимальную хирургическую тактику перед операцией, для предотвращения эндотелиально-эпителиальной дистрофии роговицы. В клиниках, где не производится данный подсчет клеток, существует более высокий риск послеоперационных осложнений.

Источник

Новинка!

Современное исследование глаз – эндотелиальная микроскопия роговицы – оценка состояния эндотелия роговицы глаз с применением микроскопа последнего поколения TOMEY EM4000 и цифровой обработкой данных.

Эндотелиальная микроскопия – это количественная и качественная оценка эндотелия – внутреннего слоя клеток роговицы (прозрачной выпуклой передней части глазного яблока). Для этого используют автомтизированный бесконтактный отражательный микроскоп последнего поколения TOMEY EM4000 и современный метод цифровой обработки данных.

Преимущества микроскопа TOMEY EM4000

Бесконтактные измерения;
Автофокусирование;
Быстрое и точное измерение – несколько секунд на обследование одного глаза;
190-кратное оптическое увеличение;
Встроенная бесконтактная пахиметрия (измерение толщины роговицы);
Доступно измерение 13 зон роговицы – центральной, 6 парацентральных и 6 периферийных.

Что определяет аппаратура, встроенная в микроскоп?

плотность клеток эндотелия (количество клеток/мм²); у большинства людей с нормальной роговицей плотность клеток эндотелия как минимум 2000 кл/мм² и разница между двумя глазами менее 300 кл/мм²;
полимегатизм клеток (разница в размерах отдельных клеток) – этот показатель CV (коэффициент вариаций, норма=0,22-0,31); при CV больше 0,40 функция эндотелия все еще будет адекватная, но эндотелий подвержен более высокому риску повреждений при проведении интраокулярных операций, при появлении глаукомы, диабета или увеита, или если используются контактные линзы;
плеоморфизм клеток (морфология – оценка количества гексагональных клеток в процентах); идеальный эндотелий роговицы должен был бы полностью состоять из гексагональных (шестиугольной формы) клеток. Человеческая роговица в норме должна содержать ~60% гексагональных клеток;
автоматически определяет “темные” зоны; Темные точки в эндотелии появляются как в случае первичной эндотелиопатии, так и вторично – после интраокулярных операций, после воспаления глаз, глаукомы, применения контактных линз.

Когда рекомендуют делать эндотелиальную микроскопию?

Точная диагностика эндотелия может помочь определить не только причину изменений, но и планировать лечение часто встречающихся заболеваний глаз – глаукому, увеит, эндотелиальную дистрофию Фукса. Эти заболевания могут вызвать изменения в структуре и функциональности эндотелия, что в результате может вызвать отек роговицы и ухудшение зрения. Использование контактных линз и интраокулярные операциимогут вызывать изменения эндотелия и способствовать появлению отека в роговице;
Если запланирована операция катаракты;
Если у эндотелия пониженные качественные показатели, то хирург может планировать операцию катаракты таким образом, чтобы по возможности меньше травмировать роговицу во время операции. Перед операцией можно оценить риск возникновения отека роговицы и информировать пациента об этих рисках;
После операции – для оценки изменения состояния роговицы;
В рефракционной хирургии. При низкой плотности клеток эндотелия не рекомендуется коррекция зрения методом имплантирования интраокулярных линз (например, Artisan или ICL). После проведенной операции желательно следить за плотностью клеток, чтобы убедиться, что не происходит хроническое снижение плотности клеток, которое требует соответствующего лечения;
После операций по трансплантации роговицы. Регулярный контроль за состоянием эндотелия после трансплантации роговицы важный момент мониторинга трансплантированных тканей. Внезапное снижение плотности клеток после операции по трансплантации роговицы (кератопластики) может свидетельствовать о воспалительной реакции или о реакции иммунологического отторжения / апоптозе, который надо незамедлительно лечить. Плотность клеток после трансплантации также служит как прогностический показатель долговременной выживаемости трансплантата;
В хирургии глаукомы. После операции глаукомы, особенно с имплантацией фильтрующего элемента, также может произойти декомпенсация роговицы. Клетки эндотелия могут быть повреждены как от самого контакта импланта с роговицей, так и в результате иммунной реакции.

Полезная информация или когда можно/нельзя проводить эндотелиальную микроскопию с помощью TOMEY EM4000

Для проведения измерений нет возрастного ограничения. Это можно делать даже маленьким детям;
Оборудование проводит измерение очень быстро и безболезненно. Во время процесса нет никакого неприятного ощущения, не требуется длительно оставаться в каком-то вынужденном положении. Во время обследования пациент сидит у аппарата и опирается подбородком на специальную полочку;
Аппарат стационарный, поэтому невозможно выполнить измерение лежачим пациентам;
Измерение может не получиться если имеется большой отек роговицы или обширное рубцевание с помутнением роговицы, а также, если повреждение эндотелия настолько значительное, что границы клеток вообще невозможно определить.

endotelija mikroskops

Источник

Роговица – это прозрачная часть наружной оболочки глаз, имеющая сферическую форму и выпукло-вогнутое строение. Благодаря прозрачности лучи света свободно проникают сквозь нее и попадают на сетчатку. Роговица, являясь важной частью оптической системы глаза, выполняет защитную, опорную, светопроводящую, преломляющую функции. Любые дегенеративные изменения в ней нарушают всю работу оптической системы.

Диагностические методики

Заболевания роговичной оболочки представляют большую опасность для человека. Она заключается в большом риске нарушения нормальной жизнедеятельности из-за ухудшения и потери зрительной функции. Из-за такой опасности важно проводить диагностические мероприятия, направленные на выявление, лечение или предупреждение глазных патологий.

Методы исследования роговицы очень разнообразны, и все они помогают выявить дегенеративные процессы в ней.

Кератотопография

Бесконтактный способ исследования нарушений в роговичном слое при помощи специального аппарата – топографа. Эта диагностическая методика основана на определении кривизны и толщины оболочки.

Кератотопография роговицы может проводиться в нескольких вариантах:

Исследование при помощи колец Пласидо. В таком случае компьютер проводит анализ изменения отражения колец, учитывая кривизну роговичного слоя. При таком варианте диагноз будет высокоинформативным за счет оценки более 10 000 точек на поверхности роговицы.
Сканирование с помощью щелевой лампы. Методика основана на прохождение узкого луча света через роговицу. Поток света направляется на определенный участок, его и исследуют.
В современных топографах объединены сразу обе методики исследования. Это дает полноценную картину состояния передней камеры глаза и задней поверхности оболочки.
Топограф с вращающейся камерой Шеймпфлюга. С помощью такой техники за 2 секунды можно получить 50 и более снимков роговицы. Прибор оценивает переднюю и заднюю ее часть, а также зрачок. Топография роговицы позволяет выявить патологические отклонения в ней.
Растровое фотографирование. Методика схожая с применением колец Пласидо, только используется откалиброванная сетка и снимки делают под разным углом. Чтобы оценить только роговичный слой, слезную пленку подкрашивают флуоресцеином, используется кобальтовый источник света.
Голографическая интерферометрия с использование лазера. С помощью процедуры изучают функциональные способности роговой оболочки в максимально приближенных к жизни условиях. В результате исследования появляется трехмерная картинка. Если она получается правильная, это означает равномерность поверхности оболочки.

Топография роговицы проводится в офтальмологических кабинетах. За пару секунд делают 50 снимков с 10 000 точек-объектов для последующего компьютерного анализа. В результате получается двух или трехмерная компьютерная модель поверхности роговицы, с полным отображением кривизны, плотности, толщины и количества роговичных слоев. Анализ данных занимает примерно 20 минут.

Биомикроскопическое исследование

Биомикроскопия роговицы проводится при помощи щелевой лампы (оптический прибор, объединяющий в себе осветитель и бинокулярный микроскоп). Исследуемую часть освещают узким пучком света, который позволяет получить оптический срез роговичной оболочки. Можно получить горизонтальную, вертикальную щель от 0,06 до 8 мм толщиной и длиной.

Щелевая лампа

Щелевая лампа позволяет исследовать заднюю пограничную пластину, эндотелий, строму, толщину роговичного слоя, наличие воспалений, дистрофии. Если имеются посттравматические рубцы, то исследуют их размеры и сращение с окружающими тканями.

Исследование эндотелиального слоя

Эндотелиальная микроскопия роговицы заключается в фотографировании клеток ее эндотелия с последующим изучением их формы, размеров и подсчетом количества на квадратный миллиметр площади. Нормальным показателем плотности эндотелиальных клеток считается 3000 на 1 кв. мм. При эндотелиальной микроскопии для подсчета плотности внутреннего слоя клеток (эндотелия) используется автоматизированный бесконтактный отражательный микроскоп, который позволяет за несколько секунд со 190 кратном оптическим увеличением обследовать роговицу. А встроенный пахиметр измеряет уровень толщины.

Пахиметрия

Толщину роговичной оболочки определяет пахиметрия роговицы, норма должна составлять в центре 0,49 – 0,62 мм, на периферии – до 1,2 мм.

Существует несколько способов проведения пахиметрии.

Оптическая. Во время исследования применяется щелевая лампа, которой в глаз направляют узкую полоску света, а также линзы, с их помощью рассматривают роговичную оболочку под мощным увеличением. Линзы устанавливают параллельно друг другу. Одна статична, другая двигается. Врач вращает ручку аппарата, изменяя угол наклона двигающейся линзы, меняя характер световых лучей. Оптическая пахиметрия роговицы помогает измерить ее толщину в различных участках.
Ультразвуковая. Контактный способ измерения толщины роговицы, поэтому проводится под местной анестезией. В ходе процедуры врач легко прикасается к оболочке ультразвуковым датчиком, который за несколько секунд обрабатывает информацию и на дисплее выдает показатели ее толщины в исследуемом участке. За несколько минут проводится исследование всей поверхности роговицы.
Компьютерная. Исследование, в ходе которого используется томограф, просвечивающий (сканирующий) роговицу инфракрасным излучением. Датчики прибора регистрируют отраженное от глазных структур излучение, после чего компьютер обрабатывает полученную информацию и выдает детальную картинку исследуемого участка.

Конфокальная микроскопия

Обследование с помощью особого микроскопа высокого разрешения. Изучают микроструктуры и клетки роговицы, измеряют ее структурные составляющие, диагностируют малейшие отклонения. Конфокальный микроскоп увеличивает изображение в 500 раз, сканирование происходит на 5 мкм. Аппарат делает снимки роговичных слоев в одной точке в разные отрезки времени с различных ракурсов, что позволяет получить детальную визуализацию тканей на микроструктурном и клеточном уровне. Конфокальная микроскопия роговицы – это бесконтактный способ исследования. Между линзой прибора и глазом капают специальный гель, исключающий их взаимодействие.

Иридодиагностика

Способ изучения негативных изменений в органах человека по цвету радужки глаза. Каждая ее часть отвечает за определенный орган и меняет свой цвет в зависимости от состояния этого органа. Специалист исследует глаз пациента с помощью увеличительных приборов. Полученные данные сверяются со специальной картой (схемой). Карта роговицы при иридодиагностике представляет собой цветную картинку, где обозначено какой орган проецируется в различных частях радужки.

Определение чувствительности

Существует несколько способов определить этот параметр. Исследование чувствительности роговицы проводят с помощью влажного кусочка ваты, скатанного в тончайший жгутик. Им осторожно касаются центра роговицы, а затем в 4 точках на периферии. Более тонкие тесты (исследования чувствительности роговицы) предполагают использование алгезиметров из человеческого волоса или прерывистой струи воздуха с давлением 15-100 мм. рт.ст.

Чувствительность устанавливают по той точке, в которой была реакция на воздействие алгезиметра. Если точек несколько, чувствительность фиксируется в каждой.

УЗИ глаза (офтальмоэхография)

Высокоинформативное исследование структур глаза, основанное на отражении волн высокой частоты от исследуемого объекта. Проводится различными способами. Одномерный А-режим (эхобиометрия) позволяет провести замеры глазных структур. В-режим (эхография) показывает внутренние структуры глаза. Сочетание А и В сканирования позволяет получить полную картину структуры роговичного слоя в одномерном и двухмерном изображение. Трехмерная эхоофтальмография показывает все структуры глаза в реальном времени вместе с сосудистой сеткой.

УЗИ биометрия и биомикроскопия позволяют получить четкую картинку обследуемой структуры глаза, полную характеристику состояния роговицы, хрусталика, глазного яблока после расшифровки эхосигнала. С помощью УЗИ роговицы глаза офтальмолог на мониторе может увидеть все необходимые характеристики роговичного слоя (целостность структуры, толщину, прозрачность).

Диагностика роговичной оболочки проводится с целью оценки ее кривизны, обнаружения возможных изменений и повреждений ее слоев (что может стать причиной проблем со зрением). При ее повреждении нарушается вся работа оптической системы. Именно для предотвращения этого процесса и необходимо проводить обследование. Это поможет предотвратить снижение или потерю зрения.

Автор статьи: Бахарева Елена Сергеевна, специалист для сайта glazalik.ru
Делитесь Вашим опытом и мнением в комментариях.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Источник